Потапящо масло: състав, характеристики, основа и употреба

Иммерсионното масло е вискозна и прозрачна течност, която има висок индекс на пречупване. Поради тази причина тя е широко използвана в микроскопските наблюдения, тъй като осигурява свойството на концентриране на светлината, когато преминава през 100-кратната цел на микроскопа, увеличавайки неговата разрешаваща способност.

Това се дължи на образуването на вискозен филм между мишената и намазката, предотвратявайки диспергирането на светлинните лъчи, когато те достигнат въздуха, концентрирайки светлинните лъчи към пробата.

Иммерсионното масло се използва само с цел 100Х. Ето защо целта на 100X се нарича също цел на потапяне. Останалите са известни като сухи цели. Тази цел не може да се използва без потапяне масло, защото без нея визуализацията не би била задоволителна.

Основната функция на потапящото масло е да осигури по-ясни, по-ясни и по-дефинирани изображения, позволявайки наблюдение на детайли, които не биха били възможни с други цели.

Първото масло, използвано за тази цел, е анисовото масло, използвано във връзка с първата леща, създадена от Giovanni Battista Amici. Това само избягва хроматичната аберация, но не увеличава числената апертура на системата от лещи.

Тогава беше използвано кедровото масло, но то имаше много недостатъци, които наложиха неговото използване. Сред тях е високата киселинност, която в краткосрочен план нарушава целите.

След това се използват други вещества като вода и глицерин, докато се създадат синтетичните имерсионни масла, които постепенно се рафинират до достигане на сегашното иммерсионно масло, което е сложно съединение на органични вещества.

Състав на потапящо масло

Имерсионното масло се състои от смес от органични съединения, като: терфенил, хидрогенирани терфенил, естествени въглеводороди и полибутени.

Характеристики на потапящото масло

Потапящото масло е светложълта течност, леко вискозен вид, с характерен мирис и плътност между 0.92 до 0.99 g / cm3.

Имерсионното масло не е разтворимо във вода и има точка на кипене от 340 ° С. Индексът на пречупване а (n 20 ° C / D): варира от 1, 482 - 1, 516. Колкото и индексът на възпаление е 110 ° С, а вискозитетът варира между 100 до 120 mPa.s.

Този продукт трябва да се изхвърля правилно, тъй като е екотоксичен. Тоест, той е вреден за околната среда, основно засягащ водните животни. От друга страна, той дразни кожата и лигавиците. Ако се погълне, той е нефротоксичен и кардиотоксичен.

Потапящото масло е стабилно при температура от 15 до 25 ° С, температура, при която трябва да се съхранява.

Основи на потапящото масло

Когато се използват лещи с по-голямо увеличение, интензивността на светлината трябва да се увеличи. Въпреки това, много от светлинните лъчи са изгубени, защото са разпръснати, когато стигнат до въздуха (пространството между покривалото и лещата), и дори някои лъчи претърпяват пълно отражение.

Потапящото масло има индекс на пречупване, подобен на този на стъкло. Следователно, когато маслото е влязло в контакт между обектива 100Х и покривното стъкло, светлинните лъчи са концентрирани.

Концентрираните лъчи пресичат пробата и увеличават остротата на изображението, т.е. увеличават числената апертура на обектива и коригират хроматичните и сферичните аберации.

Употреби или приложения

Използването на потапящо масло е особено необходимо, когато е необходимо да се наблюдава изображение по-широко, като се използва целта за по-голямо увеличение (цел от 100Х) и по този начин се виждат подробности, които са от съществено значение за установяване на диагноза.

Ето защо, тя се използва широко в микроскопски изследвания в различни области като: хистология, цитология, хематология и бактериология. Например, той е полезен за изучаване на характеристиките на клетките и тъканите на пациента.

Той също така служи за анализ на кръвните мази, където искаме да уточним характеристиките на хемопаразитите вътре и извън еритроцитите, както и в препаратите на Грам, за да дефинираме морфотинториалните характеристики на микроорганизмите.

Обикновено се използва при фиксирани препарати, тъй като не се препоръчва в пресни препарати. Това е така, защото повърхностното напрежение на маслото причинява движението на покривното покритие, което кара пробата да се движи по време на нейното наблюдение и предотвратява нейния анализ.

От друга страна, имерсионното масло не е полезно само при конвенционалната оптична микроскопия: то се използва също в тотални флуоресцентни микроскопи (TIRFM) и в конфокални флуоресцентни приложения.

Стъпки за наблюдение на препарат, използвайки потапящо масло

За да видите микроскопски препарат, първо се фокусирайте върху препарата с цел по-ниско увеличение, обикновено 10Х, с ниска интензивност на светлината.

Тогава целта на 40Х е преминала, а преминаването на светлината е леко повишено. С това увеличение може да се направи някакъв анализ, но за да видите структурни детайли, трябва да увеличите 100 пъти.

Преди да преминете към целта 100Х, капка от потапящо масло се поставя върху покривалото, точно там, където искате да го наблюдавате, и след това револвера на микроскопа, който се придвижва, за да локализира 100x целта в препарата.

Интензивността на светлината се регулира (увеличава) (преместване на кондензатора и отваряне на диафрагмата). След това, с някои малки движения, които се дават на микрометъра (напред или назад) трябва да се съсредоточи перфектно, ако микроскопът използва парафокални цели.

Ако се опитате да фокусирате препарата директно с целта за потапяне, може да има проблеми при намирането на фокуса. Това не е невъзможно действие, но трудността се увеличава значително.

грижа

За да се използва потапящото масло, трябва да се вземат под внимание някои условия.

Когато е приготвен оцветен препарат, като например намазка, оцветена с Giemsa или Gram, е необходимо да се изчака напълно разпръскването, преди да се постави потапящото масло. В противен случай, маслото заедно с водата ще образуват мицели, които няма да позволят визуализирането на препарата.

От друга страна, след наблюдение на партидата от препарати, т.е. в края на работния ден, 100X целта трябва внимателно да се почисти, като се използва хартия за етанолови лещи. Ако лещата остане замърсена, маслото ще изсъхне върху нея и тогава ще бъде много трудно да я отстраните, повреждайки зрителното поле.

Също така трябва да се има предвид, че маслото е запалимо и трябва да се пази от източници на топлина (запалки). Важно е да се избягва нагряването му над 65 ° C.

И накрая, маслото е токсичен продукт. Затова трябва да се избягва директен контакт с кожата и лигавиците, където може да предизвика леко дразнене. За да се избегнат инциденти, се препоръчва използването на ръкавици и предпазни очила за манипулиране.

В случай на контакт с маслото, зоната трябва да се измие обилно с вода. Ако маслото се пръска в очите, то трябва да се измие по същия начин, като държи очите отворени. В случай на инцидентно поглъщане е важно да се пие топла вода и да се предизвика повръщане, както и да се отиде до най-близкия лекар.